ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การใช้เทคนิคการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ ในการเพิ่มประสิทธิภาพการสืบพันธุ์ของโค : การวิเคราะห์ระดับฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรนและอีสตราไดออล โดยวิธีเอนไซม์อิมมูนโนแอสเซ : รายงานฉบับสมบูรณ์

หน่วยงาน สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การใช้เทคนิคการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ ในการเพิ่มประสิทธิภาพการสืบพันธุ์ของโค : การวิเคราะห์ระดับฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรนและอีสตราไดออล โดยวิธีเอนไซม์อิมมูนโนแอสเซ : รายงานฉบับสมบูรณ์
นักวิจัย : เพทาย พงษ์เพียจันทร์ , ปรัชญา คงทวีเลิศ , พันทิพา พงษ์เพียจันทร์
คำค้น : Animal biotechnology and related animal science , Biological sciences , BT-38-06-API-10-1 , Dairy cattle , Estradiol , Immunoassay , Livestock , Monoclonal antibodies , Progesterone , การสืบพันธุ์ , ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ , สาขาวิทยาศาสตร์การแพทย์ , อิมมูโนแอสเสย์ , อีสตราไดออล , โค , โปรเจสเตอโรน , โมโนโคลนอลแอนติบอดีย์
หน่วยงาน : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2539
อ้างอิง : http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/24520
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

วัตถุประสงค์ของโครงการนี้เป็นการใช้ประโยชน์จากเทคนิคการผลิตโมโนโคลน อลแอนติบอดีย์สำหรับพัฒนาการวิเคราะห์ฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรน(Progesterone, P4) และ อีสตราไดออล (Oestradiol, E2) ในน้ำนมของโคนมโดยการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ต่อฮอร์โมนทั้งสองชนิดเพื่อ ใช้สำหรับการวิเคราะห์แบบเอนไซม์-อิมมูนโนแอสเซ (Enzyme Immunoassay, EIA) การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ต่อฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรน ได้เตรียมอิมมูนโนเจน (Immunogen) ชนิด Progesterone-3-(O-Carboxy-methyl)Oxime:BSA หรือ Progesterone-11-Hemisuccinate:BSA สำหรับกระตุ้นการผลิตแอนติบอดีย์ต่อโปรเจสเตอร์โรน ทำโดยการใช้หนูตัวเล็กสายพันธุ์ Balb/c เป็นแหล่งของเม็ดเลือดขาวที่ผลิตแอนติบอดีย์ต่อ P4 จากการกระตุ้นให้สร้างแอนติบอดีย์ต่อ Progesterone-3-(O-Carboxy-methyl)Oxime:BSAภายหลังการตรวจพบการผลิตแอนติบอ ดีย์โดยวิธีเรดิโออิมมูนโนแอสเซ (Radioimmunoassay, RIA) นำเซลล์เม็ดเลือดขาวจากม้าม (Spleen) ของหนูมาเชื่อม (Fusion) กับเซลล์ไมอีโลม่า (Myeloma) ชนิด X63-Ag8.653 แล้วทำการคัดเลือกโคลน (Clone) ที่สามารถผลิตแอนติบอดีย์ต่อฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรน. พบหลุมที่มีแอนติบอดีย์ต่อ P4 จำนวน 6 หลุมจากทั้งหมด 43 หลุม (14%) นำกลุ่มเซลล์ไฮบริโดมา (Hybridoma) จากหนึ่งหลุมมาแยกได้ไฮบริโดมาที่ผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ต่อโปรเจสเตอร์ โรนได้ 3 โคลน จำแนกชนิดของแอนติบอดีย์ได้เป็น Immunoglobulin G1 (IgG1) 2 โคลน IgG2a 1 โคลน ได้ใช้แอนติบอดีย์จากโคลน Mab-P4-Clone-C12 ติดกับแผ่น Polyvinylidene difluoride (PVDF) เพื่อการตรวจระดับโปรเจสเตอร์โรนที่สกัดจากตัวอย่างน้ำนมโคโดยวิธีเอนไซม์ อิมมูนโนแอสเซ สามารถแยกความแตกต่างระหว่างโคที่ตั้งท้องและไม่ตั้งท้องได้อย่างชัดเจนด้วย ตาเปล่า. การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ต่อฮอร์โมนอีสตราไดออล ได้เตรียมแอนติเจนชนิด Estradiol-6-(O-Carboxy-methyl)Oxime:BSA สำหรับกระตุ้นในหนู Balb/c ปรากฏว่าการผลิตแอนติบอดีย์ของหนูมีน้อยมาก จึงได้กระตุ้นกับกระต่ายแทน จากนั้นนำเซลล์เม็ดเลือดขาวของกระต่ายที่ได้ตรวจพบการผลิคแอนติบอดีย์ต่อ อีสตราไดออลโดยวิธีเรดิโออิมมูนโนแอสเซ (Radioimmunoassay) มาเชื่อมกับเซลล์ไมอีโลม่า แล้วทำการคัดเลือกโคลนที่สามารถผลิตแอนติบอดีย์ต่อฮอร์โมน อีสตราไดออล พบโคลนที่ผลิตแอนติบอดีย์ 12 หลุมจาก 20 หลุม (60%) นำกลุ่มเซลล์ไฮบริโดมา จากหนึ่งหลุมมาแยกได้ไฮบริโดมาที่ผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ต่ออีสตราไดออ ลได้ 18 โคลน แล้วจำแนกชนิดของแอนติบอดีย์พบว่าทั้งหมดเป็น IgG ได้ใช้โคลน Mab-E2-Clone-6D8 ติดกับแผ่น Nitrocellulose เพื่อการตรวจระดับอีสตราไดออลที่สกัดจากตัวอย่างน้ำนมโคโดยวิธีเอนไซม์อิม มูนโนแอสเซ สามารถแยกความแตกต่างระหว่างโคที่เป็นสัดกับไม่เป็นสัดได้อย่างชัดเจนด้วยตา เปล่า ผลจากโครงการวิจัยนี้สามารถพัฒนาเทคนิคในการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ ทำให้ได้โมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ต่อโปรเจสเตอร์โรนและอีสตราไดออลสำหรับตรวจ การตั้งท้องและการเป็นสัดของโคนมด้วยตาเปล่า ทั้งนี้สามารถวัดนอกห้องปฏิบัติการได้

บรรณานุกรม :
เพทาย พงษ์เพียจันทร์ , ปรัชญา คงทวีเลิศ , พันทิพา พงษ์เพียจันทร์ . (2539). การใช้เทคนิคการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ ในการเพิ่มประสิทธิภาพการสืบพันธุ์ของโค : การวิเคราะห์ระดับฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรนและอีสตราไดออล โดยวิธีเอนไซม์อิมมูนโนแอสเซ : รายงานฉบับสมบูรณ์.
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
เพทาย พงษ์เพียจันทร์ , ปรัชญา คงทวีเลิศ , พันทิพา พงษ์เพียจันทร์ . 2539. "การใช้เทคนิคการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ ในการเพิ่มประสิทธิภาพการสืบพันธุ์ของโค : การวิเคราะห์ระดับฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรนและอีสตราไดออล โดยวิธีเอนไซม์อิมมูนโนแอสเซ : รายงานฉบับสมบูรณ์".
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
เพทาย พงษ์เพียจันทร์ , ปรัชญา คงทวีเลิศ , พันทิพา พงษ์เพียจันทร์ . "การใช้เทคนิคการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ ในการเพิ่มประสิทธิภาพการสืบพันธุ์ของโค : การวิเคราะห์ระดับฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรนและอีสตราไดออล โดยวิธีเอนไซม์อิมมูนโนแอสเซ : รายงานฉบับสมบูรณ์."
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2539. Print.
เพทาย พงษ์เพียจันทร์ , ปรัชญา คงทวีเลิศ , พันทิพา พงษ์เพียจันทร์ . การใช้เทคนิคการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ ในการเพิ่มประสิทธิภาพการสืบพันธุ์ของโค : การวิเคราะห์ระดับฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรนและอีสตราไดออล โดยวิธีเอนไซม์อิมมูนโนแอสเซ : รายงานฉบับสมบูรณ์. ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2539.