ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การศึกษาเบื้องต้นในการส่งถ่ายจีนสู่ข้าว (Oryza sativa L.) สายพันธุ์ กข6 และ กข15 โดย Agrobacterium tumefaciens

หน่วยงาน สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การศึกษาเบื้องต้นในการส่งถ่ายจีนสู่ข้าว (Oryza sativa L.) สายพันธุ์ กข6 และ กข15 โดย Agrobacterium tumefaciens
นักวิจัย : สุมนทิพย์ บุนนาค , ปิยะดา ธีระกุลพิศุทธิ์ , จันทร์เพ็ญ ภูอะกิต , Sumontip Bunnag , Piyada Theerakulpisut
คำค้น : Biological sciences , Breeding , CO-B-06-22-12-001 , Gene expression , Oryza sativa L. , Plant biotechnology and related agricultural science , Plant genetics , Rice , การปรับปรุงพันธุ์ , การแสดงออกของยีน , ข้าว , ข้าวพันธุ์ กข 6 , ข้าวพันธ์ กข. , สาขาเกษตรศาสตร์และชีววิทยา , สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
หน่วยงาน : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2542
อ้างอิง : http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/22399
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

สูตรอาหารที่เหมาะสมที่ใช้ในการชักนำเมล็ดข้าวพันธุ์ กข 6 ให้เกิดแคลลัสคือ อาหารสังเคราะห์สูตร N6 ดัดแปลงที่เติม 2,4 d22.5 µm, casein hydrolysate 300 mg/l และ bacto agar 0.8% (w/v) ภายใต้สภาวะที่มีแสง โดยมีเปอร์เซนต์การสร้างแคลลัสเท่ากับ 97.22% สำหรับสูตรอาหารที่เหมาะสมต่อการชักนำแคลลัสข้าวสายพันธุ์ กข 6 ให้เจริญเป็นต้นใหม่ คือ อาหารสังเคราะห์สูตร N6 ดัดแปลงที่เติม IAA 2.5 µM, casein hydrolsate 3-- mg/l และ gelrite 0.26% (w/v) ซึ่งเปอรเซนต์การเจริญเป็นต้นใหม่ของแคลลัสเท่ากับ 61.11% และมีจำนวนต้นต่อแคลลัสเท่ากับ 6 ต้น สำหรับสูตรอาหารที่ใช้ชักนำเมล็ดข้าวพันธุ์ กข 15 ให้สร้างแคลลัสคือ อาหารสังเคราะห์สูตร N6 ที่เติม 2,4 D7 µM และ bacto agar 0.8% (w/v) โดยมีเปอร์เซนต์การเกิดแคลลัสเท่ากับ 76% ส่วนอาหารที่ชักนำ แคลลัสของข้าวสายพันธ์ กข 15 ให้เจริญเป็นต้นใหม่ คือ อาหารสูตร MS ที่เติม BA 13.5 µM, kinetin 7.5 µM, NAA 4.5 µM, Casein hydrolysate 300 mg/l และ bacto agar 0.8% (w/v) โดยมีเปอร์เซนต์การเกิดเป็นต้นใหม่เท่ากับ 53% และมีจำนวนต้นเท่ากับ 8 ต้นต่อแคลลัส ในการยับยั้งการเจริญของ A. tumefactens สายพันธุ์ LBA 4404 และสายพันธุ์ EHA 105 พบว่า cefotaxine ที่ความเข้มข้น 50 mg/l และ carbenicillin ที่ความเข้มข้น 150 mg/l สามารถยับยั้งการเจริญของ A. tumefaciens ทั้งสองสายพันธุ์ได้ cefotaxine และ carbenicillin ที่ความเข้มข้น 250 mg/l เป็นความเข้มข้นที่เหมาะสมที่ใช้ในการยับยั้งการเจริญเป็นต้นของแคลลัสของข้าวทั้งสองสายพันธุ์ได้ 100% kanamycin และ hygromycin ที่ความเข้มข้น 150 mg/l และ 10 mg/l เป็นความเข้มข้นที่เหมาะสมที่ใช้ในการคัดเลือกข้าวแปลงพันธุ์สายพันธุ์ กข 6 ที่ต้้านทานต่อ kanamycin และ hygromycin ตามลำดับ สำหรับความเข้มข้นของ kanamycin ที่ใช้ในการคัดเลือกข้าวแปลงสายพันธุ์ กข 15 คือ 200 mg/l เวลาที่เหมาะสมในการบ่ม (co-cultivation) เมล็ดข้าวพันธุ์ กข 6 และ กข 15 ใน A. tumefaciens ทั้งสองสายพันธุ์คือ 50 นาที จากการตรวจสอบการแสดงออกของ GUS gene ในเมล็ดข้าวสายพันธุ์ กข 6 ที่บ่มร่วมกับ A. tumefaciencs สายพันธุ์ LBA 4404pBI 121 และสายพันธุ์ EHA105pCAMBIA 1301 มีเปอร์เซนต์ GUS เท่ากับ 89/19% และ 93.3 % ตามลำดับ สำหรับเมล็ดข้าวสายพันธุ์ กข 15 ที่บ่มร่วมกับ A. tumedaciens สายพันธุ์ LBA 4404 (pBI 121) มีการแสดงออกของ gus gene เท่ากับ 100% ผลการตรวจสอบกิจกรรมของ gus gene ในต้นข้าวแปลงพันธุ์สายพันธุ์ กข 6 และ กข 15 พบว่าทุกต้นที่นำมาตรวจสอบมีการแสดงออกของ gus gene ในทุกส่วนของพืช

The suitable medium for callus induction of rice var. RD 6 seeds was modified N6 medium containing 22.5 µM 2,4 D, 300 mg/l casein hydrolysate and 0.8% (W/V) bacto agar under light condition. The percentage of callus induction was 97.22%. Regeneration of rice var. RD 6 was enhanced up to 61.11% on the same medium supplement with 2.5 µM IAA, 18 µM BA, 300 mg/l casein hydrolysate and 0.26% (W/V) gelrite. The numbers of shoots/callus were 6. On the other hand, high percentage of callus induction at 76% was obtained when seeds of rice var. RD 15 were cultured on N6 medium containing 7µM 2,4D, 0.8% (W/V) bacto agar. Regeneration percentage of rice var. RD 15 was 53% on the same medium supplement with 13.5 µM BA, 7.5 µM kinetin, 4.5 µM NAA, 300 mg/l casein htdrolysate and 0.8% (W/V) bacto agar. The numbers of shoots / callus were 8. The minimum concentration of cefotaxine and caebenicillin for elimination A. tumefaciens were 50 mg/l and 150 mg/l respectively. The concentration of cefotaxime and carbenicillin at 250 mg/l was effective to inhibit growth of transgenic rice var. RD 6 were 150 mg/l and 10 mg/l respectively. On the other hand kanamycin concentration time of rice seeds was 50 minutes. Gus activity of rice seed var. RD 6 cocultivated with A. tumefaciens LBA 4404 pBI 121 and EHA 105 pCAMBIA 1301 was 89.10% and 93.33 % respectively. The frequency of gus expression in infected rice seed var. RD 15 was 100%. GUS assays in transgenic rice var. RD 6 and var. 15 showed that under the proper conditions transformed plants were obtained.

บรรณานุกรม :
สุมนทิพย์ บุนนาค , ปิยะดา ธีระกุลพิศุทธิ์ , จันทร์เพ็ญ ภูอะกิต , Sumontip Bunnag , Piyada Theerakulpisut . (2542). การศึกษาเบื้องต้นในการส่งถ่ายจีนสู่ข้าว (Oryza sativa L.) สายพันธุ์ กข6 และ กข15 โดย Agrobacterium tumefaciens.
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
สุมนทิพย์ บุนนาค , ปิยะดา ธีระกุลพิศุทธิ์ , จันทร์เพ็ญ ภูอะกิต , Sumontip Bunnag , Piyada Theerakulpisut . 2542. "การศึกษาเบื้องต้นในการส่งถ่ายจีนสู่ข้าว (Oryza sativa L.) สายพันธุ์ กข6 และ กข15 โดย Agrobacterium tumefaciens".
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
สุมนทิพย์ บุนนาค , ปิยะดา ธีระกุลพิศุทธิ์ , จันทร์เพ็ญ ภูอะกิต , Sumontip Bunnag , Piyada Theerakulpisut . "การศึกษาเบื้องต้นในการส่งถ่ายจีนสู่ข้าว (Oryza sativa L.) สายพันธุ์ กข6 และ กข15 โดย Agrobacterium tumefaciens."
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2542. Print.
สุมนทิพย์ บุนนาค , ปิยะดา ธีระกุลพิศุทธิ์ , จันทร์เพ็ญ ภูอะกิต , Sumontip Bunnag , Piyada Theerakulpisut . การศึกษาเบื้องต้นในการส่งถ่ายจีนสู่ข้าว (Oryza sativa L.) สายพันธุ์ กข6 และ กข15 โดย Agrobacterium tumefaciens. ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2542.