ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

One-step purification and characterization of a fully active histidine-tagged II fructose-1,6-bisphosphate aldolase from Mycobacterium tuberculosis

หน่วยงาน สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : One-step purification and characterization of a fully active histidine-tagged II fructose-1,6-bisphosphate aldolase from Mycobacterium tuberculosis
นักวิจัย : Kamolchanok Rukseree , Chinae Thammarongtham , Prasit Palittapongarnpim , กมลชนก รักเสรี , ชิเน ธำมรงค์ธรรม , ประสิทธิ์ ผลิตผลการพิมพ์
คำค้น : Aldolase assay , Fructose-1,6-Bisphosphate Aldolase , Immobilized metal affinity chromatography , ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ
หน่วยงาน : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2551
อ้างอิง : http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/17953
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

Rv0363c (fba), encoding Class II fructose-bisphosphate aldolase (FBA), is one of the potential drug targets identified in our laboratory based on minimal gene set concept. The wild-type enzyme overproduction in E. coli had been reported. However, the purification procedure was relatively tedious and the yield was low. In this study, five histidine codons were introduced into the 3′ end of the amplified fba fragments. The expressed C-terminal histidine-tagged Class II FBA was produced in E. coli BL21 (DE3) and easily purified using immobilized metal affinity chromatography. The purified his-tagged FBA was characterized. Its biochemical properties were compared to the non-his-tagged enzyme purified according to the previous report. Both FBAs have similar characteristics such as native/subunit molecular mass, kinetic parameters, and temperature/pH optima and stability. The C-terminal his-tagged FBA can be a surrogate for the native enzyme and used for screening of inhibitors of FBA. This developed expression system will pave the way for high-throughput screening and crystallization studies. Moreover, in this study, a colorimetric FBA assay has been simplified to facilitate the mass screening of inhibitor of FBA.

บรรณานุกรม :
Kamolchanok Rukseree , Chinae Thammarongtham , Prasit Palittapongarnpim , กมลชนก รักเสรี , ชิเน ธำมรงค์ธรรม , ประสิทธิ์ ผลิตผลการพิมพ์ . (2551). One-step purification and characterization of a fully active histidine-tagged II fructose-1,6-bisphosphate aldolase from Mycobacterium tuberculosis.
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
Kamolchanok Rukseree , Chinae Thammarongtham , Prasit Palittapongarnpim , กมลชนก รักเสรี , ชิเน ธำมรงค์ธรรม , ประสิทธิ์ ผลิตผลการพิมพ์ . 2551. "One-step purification and characterization of a fully active histidine-tagged II fructose-1,6-bisphosphate aldolase from Mycobacterium tuberculosis".
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
Kamolchanok Rukseree , Chinae Thammarongtham , Prasit Palittapongarnpim , กมลชนก รักเสรี , ชิเน ธำมรงค์ธรรม , ประสิทธิ์ ผลิตผลการพิมพ์ . "One-step purification and characterization of a fully active histidine-tagged II fructose-1,6-bisphosphate aldolase from Mycobacterium tuberculosis."
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2551. Print.
Kamolchanok Rukseree , Chinae Thammarongtham , Prasit Palittapongarnpim , กมลชนก รักเสรี , ชิเน ธำมรงค์ธรรม , ประสิทธิ์ ผลิตผลการพิมพ์ . One-step purification and characterization of a fully active histidine-tagged II fructose-1,6-bisphosphate aldolase from Mycobacterium tuberculosis. ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2551.