ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

The development of a novel serotyping-NS1-ELISA to identify serotypes of dengue virus

หน่วยงาน สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : The development of a novel serotyping-NS1-ELISA to identify serotypes of dengue virus
นักวิจัย : Chunya Puttikhunt , Tanapan Prommool , Nathaporn U-thainual , Prapapun Ong-ajchaowlerd , Kroong Yoosook , Chutithorn Tawilert , Thaneeya Duangchinda , Aroonroong Jairangsri , Nattaya Tangthawornchaikul , Prida Malasit , Watchara Kasinrerk , ชัญญา พุทธิขันธ์ , ฐนียา รอยตระกูล , ณาตยา ตั้งถาวรชัยกุล , ธนพรรณ พฤกษมาศ , ปรีดา มาลาสิทธิ์ , วัชระ กสิณฤกษ์
คำค้น : Dengue viruses , ELISA , Infectious diseases , NS1 , Serotyping , ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ
หน่วยงาน : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2554
อ้างอิง : http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/13753
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

Background

Dengue virus (DENV), which causes mosquito-borne disease dengue hemorrhagic fever (DHF), consists of four serotypes co-circulating in endemic areas. Currently, DENV serotypes can be identified by laborious virus isolation followed by immunofluorescent assay and sophisticated RT-PCR. Objective

To establish a new assay designated as “serotyping-NS1-ELISA” to detect the NS1 protein and to identify DENV serotypes simultaneously.

Study design

The monoclonal antibodies (Mabs) against NS1 of each DENV serotype were produced and characterized for their serotype-specificity. To develop serotyping-NS1-ELISA, the selected serotype-specific anti-NS1 Mabs were applied to detect the NS1 antigen, which was previously captured by a flavivirus cross-reactive anti-NS1 Mab. Serotyping accuracy of the developed assay was validated with NS1 from DENV-infected cell culture supernatants and from well-characterized clinical specimens.

Results

Of 30 anti-NS1 Mabs, 1 serotype-specific anti-NS1 Mab to each DENV serotype was selected based on NS1 capture ELISA results for developing the serotyping-NS1-ELISA. Using DENV-infected cell culture supernatants for validation, the selected antibodies were shown to be capable of differentiating four DENV serotypes. When acute phase plasma from DENV-infected patients was used for validation, 65 out of 85 specimens (76.5% overall sensitivity) were positive to one of the four serotypes developed in our assay. Interestingly, identification of DENV serotypes by our serotyping-NS1-ELISA was 100% accurate for DENV1, 3 and 4 and 82.4% for DENV2 as compared with standard RT-PCR. Assay specificity was 100% (90/90).

Conclusions

The developed serotyping-NS1-ELISA provides an alternative for simultaneous detection of DENV NS1 and identification of its serotype in acute patients’ specimens. The assay would be applicable for dengue diagnosis and epidemiological studies.

บรรณานุกรม :