ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไวเทลลินของกุ้งกุลาดำ

หน่วยงาน สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไวเทลลินของกุ้งกุลาดำ
นักวิจัย : ไพศาล สิทธิกรกุล , Paisan Sittikornkul
คำค้น : Animal biotechnology and related animal science , Biological sciences , BT-B-06-2B-17-005 , Giant tiger shrimp , Marine and freshwater biology , Monoclonal antibodies , Penaeus monodon , Vitellin , กุ้งกุลาดำ , สาขาเกษตรศาสตร์และชีววิทยา , โมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ , ไวเทลลิน
หน่วยงาน : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2542
อ้างอิง : http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/1774
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

โมโนโคลนอลแอนติบอดีจำเพาะต่อหน่วยย่อยของโปรตีนจากไข่แดงหรือไวเทลลิน (ในรังไข่) และไวเทลโลเจนินิ (ในเลือด) ของกุ้งกุลาดำ ผลิตโดยใช้โปรตีนในสภาพธรรมชาติและเสียสภาพธรรมชาติของสารสกัดจากรังไข่ที่ เจริญเต็มที่เป็นแอนติเจนสำหรับปลูกภูมิคุ้มกันในหนูเมาส์ ในการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีชุดแรกโดยใช้แอนติเจนสภาพธรรมชาติ สามารถผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะต่อไวเทลลินได้ โมโนโคลนอลแอนติบอดี 3 ชนิดสามารถจับกับไวเทลลินในสภาพธรรมชาติเท่านั้น และโมโนโคลนอลแอนติบอดีอีก 1 ชนิดสามารถจับกับไวเทลลินทั้งในสภาพธรรมชาติและเสียสภาพธรรมชาติสำหรับการ ผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีชุดที่สองโดยใช้แอนติเจนที่ถูกทำให้เสียสภาพ ธรรมชาติ สามารถผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีซึ่งทุกชนิดสามารถจับกับแอนติเจนทั้งสภาพ ธรรมชาติและถูกทำให้เสียสภาพธรรมชาติ โดยโมโนโคลนแอนติบดีจำนวน 20 ชนิด สามารถจับไวเทลลินหน่วยย่อยต่าง ๆ กันทั้ง 5 หน่วยย่อย รวมทั้งสามารถผลิตโมโนโคลนแอนติบอดีที่จำเพาะต่อโปรตีนในรังไข่และฮีโมไซยา นิน แอนติบอดีเหล่านี้สามารถนำมาใช้ศึกษาลักษณะโมเลกุลของไวเทลลินและไวเทลโลเจ นินของกุ้งชนิดนี้ได้ ไวเทลลินถูกสร้างครั้งแรกในรูปโปรตีนขนาด 74 และ 200 kD ก่อนและในระหว่างการเจริญเติบโตของรังไข่พบว่าโปรตีนขนาด 200 kD จะถูกตัดเป็นโปรตีนหน่วยย่อยขนาด 104 และ 83 kD จากนั้นโปรตีนขนาด 104 kD จะถูกตัดต่อไปอีกเป็นเป็นโปรตีนขนาด 58 และ 45 kD ส่วนโปรตีนขนาด 74 kD ไม่มีการเปลี่ยนแปลงใด ๆ สำหรับไวเทลโลเจนินในเลือดพบโปรตีนขนาด 200,104,83 และ 74 kD แต่ไม่พบโปรตีนขนาด 58 และ 45 kD เลย โมโนโคลนอลแอนติบอดีจำเพาะต่อไวเทลลินและไวเทลโลเจนินนั้นสามารถนำมาใช้ใน การตรวจหาระดับไวเทลโลเจนินในเลือดด้วยวิธี indirect immunoperoxidase competitve ELISA เพื่อตรวจดูความสัมพันธ์ของการเปลี่ยนแปลงไวเทลโลเจนินในเลือดระหว่าง พัฒนาการของรังไข่ในกุ้งซึ่งชักนำให้เกิดการพัฒนาของรังไข่โดยการตัดตาทั้ง 2 ข้าง พบว่าความสัมพันธ์ของระดับไวเทลโลเจนินในเลือดกับดัชนีของรังไข่ไม่สอดคล้อง กันตลอดระยะพัฒนาการของรังไข่ ทั้งนี้เนื่องจากดัชนีของรังไข่และระดับไวเทลโลเจนินในเลือดในแต่ละระยะของ พัฒนาการของรังไข่ ในกุ้งแต่ละตัวมีค่าความแปรปรวนสูงมาก อย่างไรก็ตามระดับไวเทลโลเจนินในเลือดกับระยะของพัฒนาการของรังไข่ จะมีความสัพพันธ์กันอย่างมากโดยเฉพาะเมื่อมีการตรวจสอบระดับไวเทลโลเจนิ นตลอดพัฒนาการของรังไข่ในกุ้งแต่ละตัว ในกุ้งที่รังไข่อยู่ในระยะพักไม่สามารถตรวจระดับไวเทลโลเจนินได้จนกระทั่ง รังไข่เริ่มต้นมีการพัฒนา ระดับของไวเทลโลเจนินจะสูงขึ้นอย่างรวดเร็วและคงอยู่ในระดับสูงระหว่างที่ รังไข่กำลังพัฒนาจนถึงระยะไข่สุก และระดับไวเทลโลเจนินจะลดลงอยู่ในระดับต่ำก่อนการวางไข่ในระยะวางไข่ จากการฉีดสารสกัดจากก้านตาให้กุ้งที่รังไข่อยู่ในระยะกำลังเจริญ พบว่าระดับไวเทลโลเจนินในเลือดเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วภายใน 2 ชั่วโมงและคงอยู่ในระดับสูงไม่เปลี่ยนแปลงระหว่าง 4-10 ชั่วโมง จากนั้นลดลงเล็กน้อยในชั่วโมงที่ 24 ซึ่งการเพิ่มของระดับไวเทลนินจะสัมพันธ์โดยตรงกับปริมาณของสารสกัดจากก้านตา ที่ฉีด การเพิ่มของระดับไวเทลโลเจนินในเลือดหลังจากได้รับสารสกัดจากก้านตาอาจเกิด จากฮอร์โมนยับยั้งพัฒนาการของรังไข่ (GIH) ชักนำให้มีการสลายตัวของไวเทลลินจากเซลล์ไข่ซึ่งคล้ายกับกรณีที่เกิดการสลาย ตัวของรังไข่ในกุ้งปกติเมื่อนำมาเลี้ยงในห้องปฏิบัติการ ดังนั้นการตรวจสอบฮอร์โมนยับยั้งพัฒนาการของรังไข่อาจจะสามารถทำได้โดยการ ตรวจสอบจากการเพิ่มของระดับไวเทลโลเจนินหลังจากการฉีดสารตัวอย่างที่ต้องการ ทดสอบในช่วงระยะเวลา 4-10 ชั่วโมง ซึ่งสารสกัดจากก้านตาของกุ้งตะกาด Metapenaeus affinis แสดงผลเช่นเดียวกันแต่ประสิทธิภาพต่ำกว่า แต่กรณีของสารสกัดจากก้านตากุ้งก้ามกราม Macrobrachium rosenbergii ไม่แสดงปฏิกิริยา

บรรณานุกรม :
ไพศาล สิทธิกรกุล , Paisan Sittikornkul . (2542). การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไวเทลลินของกุ้งกุลาดำ.
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
ไพศาล สิทธิกรกุล , Paisan Sittikornkul . 2542. "การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไวเทลลินของกุ้งกุลาดำ".
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
ไพศาล สิทธิกรกุล , Paisan Sittikornkul . "การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไวเทลลินของกุ้งกุลาดำ."
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2542. Print.
ไพศาล สิทธิกรกุล , Paisan Sittikornkul . การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไวเทลลินของกุ้งกุลาดำ. ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2542.