ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การโคลนนิ่งตัวอ่อนสุกรโดยใช้เซลล์ใบหูและเซลล์กล้ามเนื้อหางเป็นเซลล์ต้นแบบ:ผลของระยะเวลาหลังการเลี้ยงไข่อ่อนและฟิวส์ชั่นพารามิเตอร์ต่ออัตราการเชื่อมและการเจริญเติบโตของตัวอ่อน

หน่วยงาน สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การโคลนนิ่งตัวอ่อนสุกรโดยใช้เซลล์ใบหูและเซลล์กล้ามเนื้อหางเป็นเซลล์ต้นแบบ:ผลของระยะเวลาหลังการเลี้ยงไข่อ่อนและฟิวส์ชั่นพารามิเตอร์ต่ออัตราการเชื่อมและการเจริญเติบโตของตัวอ่อน
นักวิจัย : รังสรรค์ พาลพ่าย
คำค้น : cloning , ear cells , pig , tail muscle cells , หมู , เซลล์กล้ามเนื้อหาง , เซลล์ใบหู , โคลนนิ่ง
หน่วยงาน : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2544
อ้างอิง : http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=PDF4280001 , http://research.trf.or.th/node/588
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

ทำการทดลองเพื่อทดสอบผลของระยะเวลาหลังเลี้ยงไข่อ่อนและฟิวส์ชั่นพารามิเตอร์ที่แตกต่าง กันต่ออัตราการเชื่อมระหว่างโอโอไซท์กับเซลล์ต้นแบบและการเจริญเติบโตของตัวอ่อนใช้ micromanipulatorฉีดเซลล์ใบหูและเซลล์กล้ามเนื้อหางซึ่งเป็นเซลล์ต้นแบบเข้าไว้ในบริเวณ perivitteline space ของโอโอไซท์ที่ดูดนิวเคลียสออกแล้ว นำโอโอไซท์ครั้งละใบไปไว้ระหว่างปลายของ electrode ใน น้ำยาเชื่อมเซลล์ ในการทดลองที่ 1 ใช้กระแสไฟฟ้าDC pulse 20 V/โอโอไซท์ ระยะเวลานาน 10 20 30 40 หรือ 50 *sec 2 ครั้ง พบว่าเซลล์ใบหูและเซลล์กล้ามเนื้อหางมีอัตราการเชื่อมสูงสุดเมื่อใช้กระแสไฟ ฟ้านาน 50 ?sec (71 และ 61%) และไม่มีความแตกต่างกับกลุ่มที่ใช้เวลานาน 30 และ 40 ?sec อัตรา การเจริญเติบโตของตัวอ่อนถึงระยะ 8-เซลล์ ของเซลล์ใบหูและเซลล์กล้ามเนื้อหางสูงสุดเมื่อใช้กระแสไฟ ฟ้า นาน 50 ?sec (21 และ 18%) ซึ่งไม่มีความแตกต่างกับกลุ่มที่ใช้เวลานาน 30 และ 40 ?sec การ ทดลองนี้ตัวอ่อนหยุดเจริญที่ระยะ 8-เซลล์ ในการทดลองที่ 2 อัตราการเชื่อมและการเจริญเติบโตของตัว อ่อนถึงระยะ 8-เซลล์เมื่อใช้ DC pulse 20 V/โอโอไซท์ นาน 40 ?sec 2 ครั้ง ของโอโอไซท์ที่เลี้ยงใน หลอดแก้วนาน 36, 41 และ 46 ชั่วโมงไม่มีความแตกต่างระหว่างกลุ่มเซลล์ต้นแบบทั้งสองชนิด การ ทดลองนี้ตัวอ่อนหยุดเจริญที่ระยะ 8-เซลล์ ในการทดลองที่ 3 เมื่อใช้โอโอไซท์ที่เลี้ยงในหลอดแก้วนาน 46 ชั่วโมงและเชื่อมโดยใช้กระแสไฟฟ้า 20 V/โอโอไซท์ นาน 40 ?sec 2 ครั้ง แล้วนำตัวอ่อนระยะ 8- เซลล์มาเลี้ยงแบบ co-culture และ nonco-culture กับเซลล์บุท่อนำไข่สุกร ปรากฏว่าทั้งสองกลุ่มไม่ สามารถเจริญผ่านระยะ 8-เซลล์ การทดลองนี้อาจจะสรุปได้คือ 1) การใช้กระแสไฟฟ้า DC pulse 20V/โอ โอไซท์ นาน 30, 40 และ 50 ?sec 2ครั้ง มีความเหมาะสมในการเชื่อมเซลล์ต้นแบบทั้งสองชนิดกับโอโอ ไซท์ 2) การนำโอโอไซท์มาเลี้ยงในหลอดแก้วนาน 36, 41 และ 46 ชั่วโมง ได้อัตราการเชื่อมและเจริญ เติบโตของตัวอ่อนถึงระยะ 8-เซลล์ไม่แตกต่างกันในเซลล์ต้นแบบทั้งสองชนิด 3) ไม่สามารถตรวจสอบได้ ว่าการนำตัวอ่อนโคลนนิงระยะ 8-เซลล์มาเลี้ยงแบบ co-culture และ nonco-culture กับเซลล์บุท่อนำไข่ สุกร แบบไหนจะดีกว่ากันเนื่องจากว่าทั้งสองกลุ่มไม่สามารถเจริญผ่านระยะ 8-เซลล์ The present experiment was carried out to examine the time after maturation and differences fusion parameters on the rate of fusion of enucleated porcine oocytes with donor cells and development of embryo. Donor cells were transferred into perivitelline space of enucleated oocytes by micromanipulator. Fusion was performed by placing individual oocytes between electrodes to electrostimulate. In experiment 1, using DC pulse 20 V/oocyte either 10 20 30 40 or 50 *sec for two times each in fusion medium. The highest fusion rate was found when using fusion parameter at 50 *sec in ear cells and tail muscle cells (71 and 61%). The highest rate of embryos developed to 8-cell stage was found when using fusion parameter at 50 *sec in ear cells and tail muscle cells (21 and 18%). Embryos in this experiment could not develop beyond 8-cell stage. In experiment 2, fusion and developmental rate of embryos when using 20 V/oocyte for 40 *sec two times each of oocytes cultured at 36, 41 and 46 hr were not different among both types of donor cells. In experiment 3, using oocytes cultured at 46 hr and fusion with 20 V/oocyte for 40 *sec two times each to produced 8-cell stage reconstructed embryos. This experiment could not examine the effects of co-cultured and nonco-cultured of 8- cell stage reconstructed embryos with porcine oviductal epithelial cells because of all embryos could not develop beyond 8-cell stage. Our finding may be concluded that 1) Electrostimulation with DC pulse 20 V/oocyte for 30, 40 and 50 *sec two times each was appropriated for fusion both types of donor cells with enucleated oocytes. 2) fusion and developmental rate of embryos when using 20 V/oocyte for 40 *sec two times each of oocytes cultured at 36, 41 and 46 hr were not different among both types of donor cells. 3) Could not examine the effects of co- cultured and nonco-cultured of 8-cell stage reconstructed embryos with porcine oviductal epithelial cells because of all embryos could not develop beyond 8-cell stage.

บรรณานุกรม :
รังสรรค์ พาลพ่าย . (2544). การโคลนนิ่งตัวอ่อนสุกรโดยใช้เซลล์ใบหูและเซลล์กล้ามเนื้อหางเป็นเซลล์ต้นแบบ:ผลของระยะเวลาหลังการเลี้ยงไข่อ่อนและฟิวส์ชั่นพารามิเตอร์ต่ออัตราการเชื่อมและการเจริญเติบโตของตัวอ่อน.
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
รังสรรค์ พาลพ่าย . 2544. "การโคลนนิ่งตัวอ่อนสุกรโดยใช้เซลล์ใบหูและเซลล์กล้ามเนื้อหางเป็นเซลล์ต้นแบบ:ผลของระยะเวลาหลังการเลี้ยงไข่อ่อนและฟิวส์ชั่นพารามิเตอร์ต่ออัตราการเชื่อมและการเจริญเติบโตของตัวอ่อน".
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
รังสรรค์ พาลพ่าย . "การโคลนนิ่งตัวอ่อนสุกรโดยใช้เซลล์ใบหูและเซลล์กล้ามเนื้อหางเป็นเซลล์ต้นแบบ:ผลของระยะเวลาหลังการเลี้ยงไข่อ่อนและฟิวส์ชั่นพารามิเตอร์ต่ออัตราการเชื่อมและการเจริญเติบโตของตัวอ่อน."
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2544. Print.
รังสรรค์ พาลพ่าย . การโคลนนิ่งตัวอ่อนสุกรโดยใช้เซลล์ใบหูและเซลล์กล้ามเนื้อหางเป็นเซลล์ต้นแบบ:ผลของระยะเวลาหลังการเลี้ยงไข่อ่อนและฟิวส์ชั่นพารามิเตอร์ต่ออัตราการเชื่อมและการเจริญเติบโตของตัวอ่อน. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2544.