ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

ระบบดีเอ็นเอเซ็นเซอร์แบบใหม่สำหรับการตรวจหาเชื้อ ~iV. cholerae~i 01

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : ระบบดีเอ็นเอเซ็นเซอร์แบบใหม่สำหรับการตรวจหาเชื้อ ~iV. cholerae~i 01
นักวิจัย : นิตยา อินทราวัฒนา
คำค้น : FIBER-OPTIC , EVANESCENT WAVE , DNA SENSOR , CHOLERA , ~iVIBRIO CHOLERAE~i 01 , ~ictx~i GENE
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2544
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=45634
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

ปัจจุบันประเทศในเขตร้อนยังคงมีการแพร่ระบาดของโรคอุจจาระร่วงอย่างรุนแรง โดยมีสาเหตุจากสารพิษของเชื้อ ~iVibrio Cholerae~i 01 การตรวจหาเชื้อดังกล่าว ให้เร็วที่สุดมีความจำเป็นอย่างยิ่งเพื่อควบคุมการแพร่ระบาดของเชื้อนี้ได้อย่างทันท่วงที การตรวจหายีน ~ictx~i ซึ่งทำหน้าที่ในการผลิตคลอเลราท็อกซินโดยใช้ตัวตรวจดีเอ็นเอ ที่มีความจำเพาะมีประโยชน์อย่างมากสำหรับการตรวจหาเชื้อ ~iVibrio Cholerae~i 01 ดังนั้นจุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการพัฒนาระบบการตรวจหายีน ~ictx~i อย่างรวดเร็ว โดยใช้หลักของ Polymerase Chain Reaction (PCR) ร่วมกับเทคโนโลยีไบโอเซ็นเซอร์ ที่ใช้หลักการของ Evanescent wave ในการศึกษานี้ได้ทำการเตรียม ctx chip ซึ่งประกอบด้วยชิ้นส่วนของ PMMA prism และส่วนสำหรับบรรจุตัวอย่าง สารนิวทราวิดินและตัวตรวจดีเอ็นเอของยีน ~ictx~i ซึ่งติด ฉลากด้วยสารไบโอตินที่ปลาย 5 ของดีเอ็นเอ ถูกตรึงอยู่บนพื้นของ PMMA prism การตรวจ หายีน ~ictx~i ด้วยระบบดีเอ็นเอเซ็นเซอร์นี้ จะทำการเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอของยีน ~ictx~i ซึ่งเป็นดีเอ็นเอเป้าหมายโดยระบบ PCR ซึ่งใช้ไพรเมอร์ที่จำเพาะต่อการเพิ่มจำนวนยีน ~ictx~i ไพรเมอร์นี้จะติดฉลากด้วยสารฟลูออเรสเซ็นท์ Cy5 ที่ปลาย 5 การตรวจหา ไฮบริไดเซชั่นระหว่างตัวตรวจดีเอ็นเอกับดีเอ็นเอเป้าหมายที่มีลำดับคู่สมกันกระทำได้โดย ให้แสงที่ความยาวคลื่น 635 นาโนเมตร ผ่านมายังบริเวณที่เกิดปฏิกิริยาของดีเอ็นเอ สารฟลูออเรสเซ็นท์ Cy5 ที่ติดฉลากที่ปลาย 5 จะเรืองแสงที่ความยาวคลื่น 680 นาโนเมตร ซึ่งสามารถแปลงเป็นสัญญาณอิเล็คโทรนิคเพื่อใช้ในการแปลผลได้ จากการศึกษาพบว่าปริมาณของสารนิวทราวิดินและตัวตรวจดีเอ็นเอที่เหมาะสมสำหรับ ตรึงบนพื้นผิวของ PMMA prism คือ 0.5 mg/ml และ 1 (+,m)M ตามลำดับ และจากผลการ ทดลองพบว่าวิธีนี้มีความไวต่อดีเอ็นเอเป้าหมาย 0.2 nM เมื่อนำ PCR amplicon ของเชื้อ ~iVibrio Cholerae~i 01 จำนวน 12 ตัวอย่าง ที่ทำการเพิ่มจำนวนยีน ~ictx~i โดยใช้ ไพรเมอร์ที่จำเพาะ มาทำการตรวจหายีน ~ictx~i พบว่าวิธีนี้สามารถตรวจพบยีน ~ictx~i ทั้ง 12 ตัวอย่าง และในทางกลับกัน PcR amplicon ของเชื้อที่ไม่ใช่เชื้อ ~iVibrio~i ~iCholerae~i 01 จำนวน 12 ตัวอย่าง ไม่ปรากฏผลของของยีน ~ictx~i แต่อย่างใด จากผลการตรวจดังกล่าวจึงให้ความถูกต้องถึง 100% การตรวจหา ~iCholerae~i 01 โดยระบบดีเอ็นเอเซ็นเซอร์แบบใหม่นี้ให้ความจำเพาะและความว่องไวสูง อีกทั้งการตรวจหา ยีน ~ictx~i จาก PCR amplicon ใช้เวลาเพียง 2-3 นาที

บรรณานุกรม :
นิตยา อินทราวัฒนา . (2544). ระบบดีเอ็นเอเซ็นเซอร์แบบใหม่สำหรับการตรวจหาเชื้อ ~iV. cholerae~i 01.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
นิตยา อินทราวัฒนา . 2544. "ระบบดีเอ็นเอเซ็นเซอร์แบบใหม่สำหรับการตรวจหาเชื้อ ~iV. cholerae~i 01".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
นิตยา อินทราวัฒนา . "ระบบดีเอ็นเอเซ็นเซอร์แบบใหม่สำหรับการตรวจหาเชื้อ ~iV. cholerae~i 01."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2544. Print.
นิตยา อินทราวัฒนา . ระบบดีเอ็นเอเซ็นเซอร์แบบใหม่สำหรับการตรวจหาเชื้อ ~iV. cholerae~i 01. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2544.