ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การขยายยีนและหาลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนฟอสโฟทรานสอะเซติเลส จาก ~iSalmonella typhimurium~i (ซัลโมเนลลา ไทฟีมูเรียม)

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การขยายยีนและหาลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนฟอสโฟทรานสอะเซติเลส จาก ~iSalmonella typhimurium~i (ซัลโมเนลลา ไทฟีมูเรียม)
นักวิจัย : ชญาภรณ์ ศรัณพฤฒิ
คำค้น : ACETATE KINASE , PHOSPHOTRANSACETYLASE , RAMBACH , SALMONELLA TYPHIMURIUM
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2542
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=43471
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

พลาสมิด pDU1 มีชิ้นดีเอ็นเอขนาด 10 กิโลเบส จากเชื้อ ~iS. Typhimurium~i สายพันธุ์ 23566 ซึ่งสามารถใช้เป็นตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่จำเพาะต่อเชื้อ ~iSalmonella~i เชื้อ ~iE. Coli~i ที่มีพลาสมิด นี้จะมีโคโลนีเป็นสีชมพูบนอาหารเลี้ยงเชื้อ Rambach agar (RA) จากการพบว่ายีน acetate kinase ~i(ack)~i บน pDU6 ซึ่งเป็นพลาสมิดที่ถูกลดขนาดจาก pDU1 ไม่มีส่วน promoter ของยีน ~iack~i ดังนั้นจึงได้ทำการขยายยีนขนาด 10 กิโลเบสซึ่งเป็น ส่วน upstream ของยีน ~iack~i การวิเคราะห์ลำดับนิวคลีโอไทด 3 กิโลเบส upstream ของยีน ~iack~i พบยีนที่ครบสมบูรณ์ของอีกยีนหนึ่ง มีขนาด open reading frame 384 คู่เบส ซึ่งจะสามารถเปลี่ยน รหัสเป็นกรดอะมิโนได้โปรตีนขนาด 14.37 กิโลดาลตัน ซึ่งอาจจะเป็นยีน phosphotransacetylase ~i(pta)~i ซึ่งในเชื้อแบคทีเรียหลายชนิดจะพบเป็น operon เดียวกับยีน ~iack~i เพื่อที่จะทดสอบ ความเป็นไปได้ของการแสดงออกของยีน ~iack~i และ ~ipta~i จึงได้ทดลองศึกษาหาระดับเอนไซม์ acetate kinase และ phosphotransacetylase จาก ~iE.coli~i transformants ชนิดต่างๆ ที่มีพลาสมิดที่มียีน ~iack~i อยู่ร่วมกับส่วน upstream region ของมัน (pDU19) หรือที่มีแต่ยีน ~iack~i เพียงอย่างเดียว (pDU12 และ pDU8-12R) และพลาสมิดที่มีแต่ส่วน upstream ของ ~iack~i เพียงอย่างเดียว (pDU16) ผลการทดลองพบว่าระดับเอนไซม์ระหว่าง transformant ทั้ง 3 กลุ่ม ไม่มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ เนื่องจากพลาสมิดชนิดต่างๆ เช่น pDU17 และ pDU18 ที่ไม่มียีน ~iack~i ยังคงทำให้เชื้อ ~iE.coli~i มีสีแดงอยู่ ดังนั้นยีน ~iack~i จึงไม่ใช่ยีนที่ทำให้เกิดโคโลนีสีแดงบน RA pDU18 ซึ่งมีส่วนของ ดีเอ็นเอมาจาก pDU1 สามารถทำให้เชื้อ ~iE.coli, S.typhi~i และ ~iS.paratyphi~i ซึ่งปรกติไม่มีสีบน RA สามารถสร้างโคโลนีสีแดงได้บนอาหารเลี้ยงเชื้อดังกล่าว ผลการทดลองนี้ชี้ให้เห็นว่ายีนที่อยู่ บน pDU18 มีความสามารถทำให้เซลล์สร้างกรดได้มากเกินกว่าปรกติ ซึ่งมีผลต่อการเกิดสีแดง บน RA ผลการวิเคราะห์ลำดับกรดอะมิโนของชิ้นดีเอ็นเอขนาด 1 กิโลเบสในพลาสมิด pDU18 แสดงให้เห็นว่า มียีนที่เปลี่ยนรหัสเป็นกรดอะมิโนที่คล้ายคลึงกับกรดอะมิโนที่ยับยั้งการทำงาน ของเอ็นไซม์ดีเอ็นเอไจเรส (DNA gyrase inhibitory protein) ที่พบใน ~iE.coli~i แต่ผลของ HPLC ในการวิเคราะห์ปริมาณกรดผสมและฟอสเฟต ยังไม่สามารถระบุได้ว่ากรดหรือสารชนิดใดมีผลต่อ การเกิดสีแดงอย่างแท้จริง โดยอาจเป็นกรดอื่น ที่ไม่สามารถตรวจพบได้ โดยใช้ column HPLC นี้

บรรณานุกรม :
ชญาภรณ์ ศรัณพฤฒิ . (2542). การขยายยีนและหาลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนฟอสโฟทรานสอะเซติเลส จาก ~iSalmonella typhimurium~i (ซัลโมเนลลา ไทฟีมูเรียม).
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ชญาภรณ์ ศรัณพฤฒิ . 2542. "การขยายยีนและหาลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนฟอสโฟทรานสอะเซติเลส จาก ~iSalmonella typhimurium~i (ซัลโมเนลลา ไทฟีมูเรียม)".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ชญาภรณ์ ศรัณพฤฒิ . "การขยายยีนและหาลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนฟอสโฟทรานสอะเซติเลส จาก ~iSalmonella typhimurium~i (ซัลโมเนลลา ไทฟีมูเรียม)."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2542. Print.
ชญาภรณ์ ศรัณพฤฒิ . การขยายยีนและหาลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนฟอสโฟทรานสอะเซติเลส จาก ~iSalmonella typhimurium~i (ซัลโมเนลลา ไทฟีมูเรียม). กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2542.