ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การศึกษาคุณสมบัติของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. phaseoli ที่มีการกลายพันธุ์ที่ยีน oxyR

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การศึกษาคุณสมบัติของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. phaseoli ที่มีการกลายพันธุ์ที่ยีน oxyR
นักวิจัย : อภิชาติ อู๋ไพจิตร
คำค้น : -
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2540
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=42058
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

พลาสมิด pSMOX-1 ที่มียีน oxyR ได้ถูกแยกจากห้องสมุด DNA ของแบคทีเรีย X. c. pv. phaseoli (Xp) โดยวิธี complementation ใน E. coli สายพันธุ์ GS08 ซึ่งมีการ กลายพันธุ์ที่ยีน oxyR ทำให้ไวต่อสาร H(,2)O(,2) การคัดเลือก E. Coli ที่ได้รับยีนดังกล่าวทำได้โดยอาศัยคุณสมบัติที่ E. coli สายพันธุ์ GS08 กลับมาดื้นต่อสาร H(,2)O(,2) จากการ ศึกษาโดยวิธี Southern blot ยืนยันว่ายีส oxyR นี้มาจาก เชื้อ Xp จริงและมีเพียง copy number เดียว ในขณะเดียวกัน ยีน oxyR ยังมีความ homology กับยีน oxyR จากเชื้อ Xanthomonas species อื่นๆ ยีน oxyR ได้ถูกแยกออกจาก พลาสมิด pSMOX-1 โดยวิธี polymerase chain reaction (PCR) ในการศึกษาบทบาทของยีน oxyR ที่มีต่อเซลล์พบว่า ยีน oxyR มีส่วนทำให้ทั้งเชื้อ E. coli ที่มีการกลายพันธุ์ ที่ยีน oxyR (JTG101, GS08) และเชื้อ Xp สามารถดื้อ ต่อสาร organic hydroperoxides และ H(,2)O(,2) ได้เพิ่มขึ้น แต่จะไม่พบเหตุการณ์เช่นนี้ในเชื้อ E. coli wild type จากขนาดของ mRNA ของยีน oxyR ที่ได้จาก Northern blot ชี้ให้เห็นว่า ยีนนี้ถูก transcribe มาพร้อมกับยีนอื่น จากการศึกษาโดยวิธี Western blot ที่ใช้ polyclonal antibody ต่อโปรตีน OxyR แสดงให้เห็นว่าการสร้างโปรตีน OxyR ซึ่งมีขนาดประมาณ 35 kDa สามารถถูกเหนี่ยวนำได้ด้วย organic hydroperoxides, H(,2)O(,2), menadione และ CdC1(,2) เมื่อเชื้อ Xp ถูกทำลายยีน oxyR โดยวิธีการ แทนที่ยีนบริเวณที่เหมือนกัน จะได้เชื้อ Xanthomonas ที่กลาย พันธุ์สายพันธุ์ XpOX1 พบว่าแบคทีเรียสายพันธุ์นี้มีความไวต่อ สาร organic hydroperoxides, H(,2)O(,2) และสาร ที่สร้าง superoxide เช่น menadione และ paraquat เพิ่มขึ้น ระดับเอนไซม์ catalase และ glutathione reductase มีปริมาณลดลง และยังสูญเสียความสามารถ adaptive response และ cross protection response ต่อ tert-butyl hydroperoxide และ H(,2)O(,2) นอกจากนี้ ยังพบว่ายีน oxyR สามารถ complement ให้แบคทีเรียสายพันธุ์ XpOX1 กลับมาดื้นต่อสาร organic hydroperoxides และ H(,2)O(,2) ในระดับเดียวกับ wild type ผลการศึกษาต่างๆ สนับสนุนว่าโปรตีน OxyR มีบทบาทสำคัญในกลไกการป้องกันเชื้อ Xp จากสารพิษ peroxide แบคทีเรีย Xanthomonas สายพันธุ์ XpHR เป็นสายพันธุ์ ที่ทนทานต่อ H(,2)O(,2) และ tert-butyl hydroperoxide มากกว่า wild type จากการศึกษาโปรตีนของสายพันธุ์ XpHR โดยใช้ SDS-PAGE และระดับของเอนไซม์พบว่า ปริมาณโปรตีน เปลี่ยนแปลงอย่างน้อย 8 ชนิด มี 6 ชนิดเพิ่มมากขึ้น เช่น เอนไซม์ catalase, glutathione reductase และ alkyl hydroperoxide reductase ซึ่งเอนไซม์ดังกล่าวมีหน้าที่ สำคัญในการลดระดับความเป็นพิษของสาร peroxide และถูก ควบคุมการสร้างโดยยีน oxyR แบคทีเรียสายพันธุ์ XpHROX1 คือเชื้อ XpHR ที่ถูกทำลายยีน oxyR หลังจากทำการศึกษาโดย วิธีการเช่นเดียวกับแบคทีเรียสายพันธุ์ XpOX1 พบว่า สายพันธุ์ XpOX1 และ XpHROX1 มีลักษณะ phenotype ที่คล้ายคลึงกัน แต่อย่างไรก็ตามพบว่าแบคทีเรียสายพันธุ์ XpHROX1 ยังคงมี ความไวต่อ metal ions ได้แก่ CdC1(,2), CoC1(,2) และ NiC1(,2) เช่นเดียวกันกับแบคทีเรียสายพันธุ์ XpHR ผลการทดลอง สนับสนุนว่าลักษณะ phenotype ของแบคทีเรียสายพันธุ์ XpHR มีสาเหตุหนึ่งมาจาก overexpression ของยีน oxyR และมี ความเป็นไปได้ว่าแบคทีเรียสายพันธุ์นี้มีความผิดปกติที่ยีนซึ่ง ควบคุม metal ions

บรรณานุกรม :
อภิชาติ อู๋ไพจิตร . (2540). การศึกษาคุณสมบัติของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. phaseoli ที่มีการกลายพันธุ์ที่ยีน oxyR.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
อภิชาติ อู๋ไพจิตร . 2540. "การศึกษาคุณสมบัติของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. phaseoli ที่มีการกลายพันธุ์ที่ยีน oxyR".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
อภิชาติ อู๋ไพจิตร . "การศึกษาคุณสมบัติของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. phaseoli ที่มีการกลายพันธุ์ที่ยีน oxyR."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2540. Print.
อภิชาติ อู๋ไพจิตร . การศึกษาคุณสมบัติของเชื้อ Xanthomonas campestris pv. phaseoli ที่มีการกลายพันธุ์ที่ยีน oxyR. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2540.