ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การพัฒนาเครื่องหมายทางพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับเพศในหอยเป๋าฮื้อเขตร้อนชนิด Haliotis asinina

หน่วยงาน สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การพัฒนาเครื่องหมายทางพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับเพศในหอยเป๋าฮื้อเขตร้อนชนิด Haliotis asinina
นักวิจัย : เผดิมศักดิ์ จารยะพันธุ์
คำค้น : Abalone , EST and cDNA subtractio , EST และ cDNA subtraction , sex-specific markers , หอยเป๋าฮื้อ , เครื่องหมายที่จำเพาะต่อเพศ
หน่วยงาน : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2548
อ้างอิง : http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=BGJ4480019 , http://research.trf.or.th/node/193
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

จากการค้นหาเครื่องหมายพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับเพศในหอยเป๋าฮื้อ H. asinina ด้วยเทคนิค RT-PCR, amplified fragment length polymorphism (AFLP), expressed sequence taq (EST) and subtractive cDNA เมื่อทำการค้นหายีน DMRT1 ของหอยเป๋าฮื้อ H. asinina ด้วยเทคนิค RT-PCR พบยีนนี้มีการแสดงออกเฉพาะในอัณฑะ แต่ไม่แสดงออกในรังไข่ของหอยเป๋าฮื้อ และจากการใช้เทคนิค AFLP โดยใช้ไพรเมอร์ทั้งหมด 224 คู่ผสมของ EcoRI / Mse I ไพรเมอร์ โดยใช้ดีเอ็นเอเพศผู้ 2 กลุ่ม (M1 = 10 และM2 = 8) และเพศเมีย 2 กลุ่ม (F1 = 10 และF2 = 8) พบเครื่องหมาย AFLP ที่จำเพาะต่อเพศผู้จำนวน 7 เครื่องหมาย และเพศเมียจำนวน 7 เครื่องหมาย และนำเครื่องหมายทั้งหมดไปโคลน หาลำดับนิวคลีโอไทด์ และได้คัดเลือกโคลนมาออกแบบเครื่อง SCAR ของเพศผู้จำนวน 2 เครื่องหมาย และเพศเมียจำนวน 4 เครื่องหมาย จากผลพบว่าเครื่องหมาย SCAR ทั้งหมดสามารถเพิ่มจำนวนได้ทั้งในดีเอ็นเอของหอยเป๋าฮื้อทั้งเพศผู้ และเพศเมีย. จากการสร้างห้องสมุด cDNA ทั้งห้องสมุด Normal cDNA และห้องสมุด subtractive cDNA จากรังไข่ และอัณฑะของ H. asinina เพื่อหาเครื่องหมารย EST โดยจำนวนโคลนทั้งหมดที่หาลำดับนิวคลีโอไทด์คือ 588 โคลน ประกอบด้วย 200 โคลน และ 118 โคลน จากห้องสมุด normal cDNA และ 110 โคลน และ 160 โคลน จากห้องสมุด subtractive cDNA ของรังไข่ และอัณฑะ ตามลำดับ พบยีน vitelline coat proteins มีการแสดงออกมากถึง 20.5% ในรังไข่ ส่วนในอัณฑะพบ sperm lysine มีการแสดงออกมากประมาณ 8.5% และเมื่อทำการตรวจสอบการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับเพศด้วย RT-PCR พบว่ายีน vitelline coat protein homologue (VCPg1, VCPg3, VCPg7, VCPHa49 และ VCPHa75) และ vitellogenin-1 homologue มีการแสดงออกจำเพาะในหอยเป๋าฮื้อเพศเมีย และยีน axonemal p66.0 protein homologue, tektin A1 homologue และ sperm lysin homologue มีการแสดงออกจำเพาะในหอยเป๋าฮื้อเพศผู้ Sex-determination markers of the tropical abalone H. asinina were identified and characterized by RT-PCR, amplified fragment length polymorphism (AFLP), expressed sequence taq (EST) and subtractive cDNA approaches. DMRT1 homologue of H. asinina was identified by RT-PCR analysis. This gene expressed in tests but not in ovaries. Two bulked genomic DNA of male (M1=10 and M2=8) and female (F1=10 and F2=8) abalone were tested against 224 AFLP primer combinations of EcoRI Imse I. Fourteen candidate sex-specific AFLP markers of female (7 markers) and male (7 markers) abalone were cloned and characterized. Two SCAR markers of male and four SCAR markers of female were developed and tested with genomic DNA of male and female. Results indicated thes SCAR markers can be amplify genomic DNA both male and female. Normal and subtractive cDNA libraries from ovaries and testes of H. asinina were established for isolation of EST markers. In a total, 588 randomly selected clones (200 and 118 transcripts for normal and 110 and 160 transcripts for subtractive libraries from ovaries and testes, respectively) were unidirectional sequenced. The vitelline coat proteins (41 clones, 20.5%) were abundantly expressed in ovaries of H. asinina. In contrast, the most abundant transcripts in testes of H. asinina was sperm lysine (10 clones, 8.5%). Tissue-specific expression of sex-related genes were examined by RT-PCR. Sex-specific expression was found from vitelline coat protein homologue (VCPg1, VCPg3, VCPg7, VCPHa49 and VCPHa75) and vitellogenin-1 homologue in femal abalone and axonemal p66.0 protein homologue, tektin A1 homologue and sperm lysin homologue in male abalone.

บรรณานุกรม :
เผดิมศักดิ์ จารยะพันธุ์ . (2548). การพัฒนาเครื่องหมายทางพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับเพศในหอยเป๋าฮื้อเขตร้อนชนิด Haliotis asinina.
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
เผดิมศักดิ์ จารยะพันธุ์ . 2548. "การพัฒนาเครื่องหมายทางพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับเพศในหอยเป๋าฮื้อเขตร้อนชนิด Haliotis asinina".
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
เผดิมศักดิ์ จารยะพันธุ์ . "การพัฒนาเครื่องหมายทางพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับเพศในหอยเป๋าฮื้อเขตร้อนชนิด Haliotis asinina."
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2548. Print.
เผดิมศักดิ์ จารยะพันธุ์ . การพัฒนาเครื่องหมายทางพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับเพศในหอยเป๋าฮื้อเขตร้อนชนิด Haliotis asinina. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2548.