ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารฟลาวานอยด์ที่สกัดจากต้นว่านมหากาฬ (Gynura pseudochina L.DC.) โดยเครื่อง Electron Paramagnetic Resonance (EPR) spectroscopy

หน่วยงาน สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารฟลาวานอยด์ที่สกัดจากต้นว่านมหากาฬ (Gynura pseudochina L.DC.) โดยเครื่อง Electron Paramagnetic Resonance (EPR) spectroscopy
นักวิจัย : วรนันต์ นาคบรรพต
คำค้น : antioxidant , flavonoid , Gynura pseudochina (L.) DC. , Phenol , ว่านมหากาฬ , สารต้านอนุมูลอิสระ , สารประกอบฟลาโวนอยด์ , สารประกอบฟีนอล
หน่วยงาน : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2554
อ้างอิง : http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=DBG5080016 , http://research.trf.or.th/node/6111
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

ว่านมหากาฬ (Gynura pseudochina (L.) DC.) เป็นพืชสมุนไพรพื้นบ้านของประเทศไทย มีสรรพคุณ เกี่ยวข้องกับสารต้านอนุมูลอิสระ และจัดเป็นพืชที่มีความสามารถสะสมสังกะสีได้สูง งานวิจัยนี้จึงมี วัตถุประสงค์เพื่อศึกษาการสกัดสารต้านอนุมูลอิสระจากว่านมหากาฬส่วนลำต้นใต้ดินทั้งส่วนเนื้อและส่วนเพอริเดิร์ม และส่วนใบ โดยใช้ตัวทำละลายที่มีขั้วแตกต่างกัน คือ เฮกเซน เอทานอล เมทานอล 99.9เปอร์เซ็นต์ และเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ ทำการศึกษาโดยวัดปริมาณสารประกอบฟีนอลทั้งหมด สารประกอบฟลาโวนอยด์ทั้งหมด และ ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ ผลการสกัดในระบบขวดเขย่าพบว่าการสกัดสารประกอบฟีนอลทั้งหมด เมทานอล 99.8 เปอร์เซ็นต์ และเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์สกัดสารประกอบฟีนอลทั้งหมดจากส่วนใบได้ปริมาณมากกว่าเอทานอล และเฮกเซน อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p< 0.01)โดยมีค่าเท่ากับ 15.72 ± 0.64, 14.03 ± 0.89, 10.79 ± 1.45 และ 0.23 ± 0.05 mg GA g-1 dry wt.ตามลำดับ นอกจากนี้เมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ สกัดสารประกอบฟีนอลจากส่วนเพอริเดิร์มและส่วนเนื้อได้มากที่สุด (p< 0.01) โดยมีค่าเท่ากับ 9.57 ± 0.23 และ 2.25 ± 0.21mg GA g-1 dry wt. สำหรับการสกัดสารประกอบฟลาโวนอยด์ทั้งหมดพบว่าเมทานอล 99.8 เปอร์เซ็นต์ สกัดสารประกอบ ฟลาโวนอยด์ทั้งหมดจากส่วนใบได้มากกว่าเอทานอล เมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ และเฮกเซน อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ(p< 0.01) โดยมีค่าเท่ากับ 104.16 ± 3.84, 88.16 ± 8.72, 57.74 ± 6.91 และ 0.63 ± 0.12 mg QE g-1 drywt. ตามลำดับ นอกจากนี้เมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์สกัดสารประกอบฟลาโวนอยด์จากส่วนเพอร์ริเดิร์มและส่วนเนื้อได้มากที่สุดโดยมีค่าเท่ากับ 9.57 ± 0.23 และ 2.25 ± 0.21 mg QE g-1 dry wt. ฤทธิ์การต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดจากส่วนใบที่สกัดด้วยเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ เมทานอล 90 เปอร์เซ็นต์ และเอทานอลไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p< 0.01) โดยมีค่าเท่ากับ 91.7 ± 0.3, 91.4 ± 0.3 และ 89.9 ± 0.3 ตามลำดับ ส่วนเพอริเดิร์มและส่วนเนื้อที่สกัดด้วยเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์มีฤทธิ์การต้านอนุมูลอิสระเท่ากับ 82.8 ± 0.6 และ 23.1 ± 0.1 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ผลการสกัดในระบบคอลัมน์ในการสกัดครั้งที่หนึ่งพบว่าการสกัดส่วนเนื้อในระบบคอลัมน์อย่างต่อเนื่องด้วย เฮกเซน เอทานอล และเมทานอล 99.8เปอร์เซ็นต์ สกัดสารประกอบฟีนอลทั้งหมดได้เท่ากับ 0.31 ± 0.02, 1.72 ± 1.01 และ 2.31 ± 0.62 mg GA g-1 dry wt. ตามลำดับ และผลการสกัดสารประกอบฟลาโวนอยด์ทั้งหมดพบว่า เอทานอล และเมทานอล99.8 เปอร์เซ็นต์ สกัดได้เท่ากับ 22.56 และ 17.09 mg QE g-1 dry wt. ตามลำดับ โดยมีฤทธิ์การต้านอนุมูลอิสระเท่ากับ 1.3 ± 0.3 และ 3.2 ± 0.1 เปอร์เซ็นต์ การสกัดส่วนเพอริเดิร์มในระบบคอลัมน์อย่างต่อเนื่องด้วยเฮกเซน เอทานอล เมทานอล 99.9 เปอร์เซ็นต์ และเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ สกัดสารประกอบฟีนอลทั้งหมดได้ 0.42 ± 0.06, 1.97 ± 0.25, 2.36 ± 0.38 และ 5.22 ± 1.95 mg GA g-1 dry wt. ตามลำดับ และสกัดสารประกอบฟลาโวนอยด์ทั้งหมดได้ 4.36 ± 1.40, 30.41 ± 4.36, 14.01 ± 1.56และ 18.55 ± 8.80 mg QE g-1 dry wt. โดยมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ เท่ากับ 1.3 ± 0.1, 2.6 ± 0.4, 4.9 ± 0.1และ16.6 ± 3.6 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ การสกัดส่วนใบในระบบคอลัมน์อย่างต่อเนื่องด้วย เฮกเซน เอทานอล เมทานอล 99.9 เปอร์เซ็นต์ และเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ สกัดสารประกอบฟีนอลทั้งหมดได้ เท่ากับ 0.74 ± 0.18, 7.94 ± 0.18, 10.24 ± 0.33 และ 25.78 mg GA g-1 dry wt. และสกัดสารประกอบ ฟลาโวนอยด์ทั้งหมดได้ 8.43 ± 7.15, 54.07 , 89.07 และ 138.3 mg QE g-1 dry wt. โดยมีฤทธิ์ต้านอนุมูล อิสระเท่ากับ 1.1 ± 0.1, 18.2 ± 0.1, 29.0 ± 0.6 และ 48.1 ± 1.7 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ค่า IC50 ของสารสกัดส่วนใบด้วยตัวทำละลายเอทานอล เมทานอล 99.9 เปอร์เซ็นต์ และ เมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ มีค่าเท่ากับ 0.0041 ± 0.0002, 0.0028 ± 0.0001และ 0.0040 mg GA g-1 ml reaction ตามลำดับ ซึ่งบ่งชี้ว่าในสารสกัดมีองค์ประกอบของสารที่มีความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระปริมาณสูง และเมื่อทำการวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีของสารสกัดด้วย HPLC พบว่าสารส่วนใหญ่ที่พบ คือ caffeic acid, epicatechin, rutin,myricetin, quercetin, และ kaempferol โดยสารสกัดจากใบที่สกัดด้วยเอธานอลมีปริมาณสาร rutin และ myricetin มากที่สุด คือ 16,592.2 ± 5216.9 และ 3228.1 ± 1362.5 μg g-1 μg g-1 dry wt. ตามลำดับนอกจากนี้ยังพบว่า epicatechin และ vanillin มีปริมาณมากที่สุดในสารสกัดจากใบที่สกัดด้วยเมทานอล 50เปอร์เซ็นต์ คือ 3592.4 ± 670.4 และ 66.0 μg g-1 dry wt. μg g-1 dry wt. ตามลำดับ โดยสารสำคัญในใบพืชซึ่งสกัดด้วยเมทานอล 50% ที่ยืนยันได้ด้วยเทคนิค LC-MS คือสาร Rutin และสารสำคัญในลำต้นใต้ดินส่วนเพอริเดิร์มซึ่งสกัดด้วยเอทานอลที่ยืนยันได้ด้วยเทคนิค LC-MS คือ สาร caffeic acid ผลการศึกษาข้างต้นแสดงให้เห็นว่าปริมาณสารประกอบฟีนอล ปริมาณสารประกอบฟลาโวนอยด์ รวมทั้งชนิดและโครงสร้างของสารประกอบฟีนอลมีความสัมพันธ์กับฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัด นอกจากนี้การวิเคราะห์ปริมาณสังกะสีในสารสกัดของต้นว่านมหากาฬที่เจริญในดินปนเปื้อนสังกะสี พบว่าสารสกัดใบสด 1กรัม ด้วยเมทานอลปริมาตร 5 มิลลิลิตร มีปริมาณสังกะสีเท่ากับ 0.007 ± 0.001 มิลลิกรัม คิดเป็น 4% ของสังกะสีที่สะสมในพืช ซึ่งยังคงอยู่ในเกณฑ์มาตรฐานอาหาร ดังนั้นงานวิจัยจึงนี้สามารถนำไปสู่แนวทางการใช้ประโยชน์ว่านมหากาฬที่สามารถปลูกได้ในพื้นที่ปนเปื้อนโลหะสังกะสีเพื่อฟื้นฟูสภาพดิน Waan-Ma-Ha-Kan (Gynura pseudochina (L.) DC.) is a folk medicinal plant of Thailand. Its properties tend to be involved with antioxidant activity. In addition, the plant has been classified as a zinc hyperaccumulator. Therefore, this research aims to study the extraction of antioxidants from the different parts of the plant: leaves, the medulla and periderm of tuber. Solvents with different polarities were used in this study: 99.5% hexane, 99.8% ethanol, 99.8% methanol and 50% methanol. Antioxidant activities of the extracts were analysed for total phenolic content (TPC), total flavonoid content (TFC) and free radical scavenging activity (% FRSA). In a shaking flask system, the TPC of the leaves extracted by 99.8% methanol was significantly greater amounts (p<0.01) than 50% methanol, ethanol and hexane. The TPC extracts were 15.72 ± 0.64, 14.03 ± 0.89, 10.79 ± 1.45 and 0.23 ± 0.05 mg GA g-1 dry wt. respectively. While 50% methanol was the best solvent (p<0.01) to extract TPC from the periderm and medulla with 9.57 ± 0.23 and 2.25 ± 0.21 mg GA g-1 dry wt., respectively. TFC of the leaves extracted by 99.8% methanol was significantly greater amounts (p<0.01) than ethanol, 50% methanol and hexane. The TFC extracts were 104.16 ± 3.84,88.16 ± 8.72, 57.74 ± 6.91 and 0.63 ± 0.12 mg QE g-1 dry wt. respectively. Whereas, 50%methanol was the best solvent (p<0.01) to extract TFC from the periderm and medulla with 9.57 ± 0.23 and 2.25 ± 0.21 mg QE g-1 dry wt., respectively. The FRSA of the leaf extracts, of 50%methanol, 99.8% methanol and ethanol were not significantly different (p> 0.01) with 91.7 ± 0.3,91.4 ± 0.3 % and 89.9 ± 0.3 %, respectively. While the FRSA of the periderm and medulla extracts of 50% methanol were 82.8 ± 0.6 % and 23.1 ± 0.1 %, respectively. Extractions in a column system were carried out by a series of solvents which were hexane, ethanol, 99.8% methanol and 50% methanol, respectively. The results showed TPC in the series of medulla extracts by hexane, ethanol and 99.8 % methanol were 31 ± 0.02, 1.72 ± 1.01 and 2.31 ± 0.62 mg GA g-1 dry wt. respectively. TFC in the series of medulla extracts by ethanol and 99.8 % methanol were 22.56 and 17.09 mg QE g-1 dry wt ., respectively; and the FRSA were 1.3 ± 0.3 and 3.2 ± 0.1%,respectively. TPC in the series of periderm extracts by hexane, ethanol, 99.8 % methanol and 50% methanol were 42 ± 0.06, 1.97 ± 0.25, 2.36 ± 0.38 and 5.22 ± 1.95 mg GA g-1 dry wt., respectively. TFC in the series of periderm extracts by hexane, ethanol, 99.8% methanol and 50% methanol were 36 ± 1.40, 30.41 ± 4.36, 14.01 ± 1.56 and 18.55 ± 8.80 mg QE g-1 dry wt., respectively. While FRSA were 1.3 ± 0.1, 2.6 ± 0.4, 4.9 ± 0.1 and 16.6 ± 3.6%, respectively. TPC in the series of leaf extracts by hexane, ethanol, 99.8% methanol and 50% methanol were 0.74 ± 0.18, 7.94 ± 0.18, 10.24 ± 0.33 and 25.78 mg GA g-1 dry wt., respectively. TFC in the series of leaf extracts by hexane, ethanol, 98.9% methanol and 50% methanol were 8.43 ± 7.15, 54.07, 89.07 and 138.3 mg QE g-1 dry wt., respectively. The inhibitory concentration (IC50) of leaves extracted by ethanol, 99.8% methanol and 50% methanol were 0.0002, 0.0028 ± 0.0001 and 0.0040 mg GA g-1 ml reaction, respectively. The small IC50 values indicated that the extract contained high antioxidant compounds. The HPLC chromatogram indicated that the most common compounds in all extracts were caffeic acid, epicatechin, rutin, myricetin, quercetin and kaempferol. The contents of rutin and myricetin were the highest in leaf extracts by ethanol with 16,592.2 ± 5216.9 and 3228.1 ± 1362.5 μg g-1 dry wt., respectively. Whereas, the amounts of epicatechin and vanillin were the highest in leaves extracted by 50% methanol with 3592.4 ± 670.4 and 66.0 μg g-1 dry wt., respectively. A phytochemical in leaf extract by 50% methanol was confirmed by LC-MS as rutin, and periderm extract by ethanol was caffeic acid. Consequently, all results clearly showed that the amount of TPC and TFC and the structure of phenolic compounds in the extracts were related to their free radical scavenging activity. Moreover, the leaf extracts of plant grown in zinc contaminated soil with 0.007 ± 0.001 mg in 5 ml of methanol, contained 4% of the zinc accumulated in the leaves. However, the zinc contaminant was within the legal food standard. Finally, this research can be applied to the phytoremediation of zinc contaminated area by growing G. pseudochina (L.) DC.

บรรณานุกรม :
วรนันต์ นาคบรรพต . (2554). การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารฟลาวานอยด์ที่สกัดจากต้นว่านมหากาฬ (Gynura pseudochina L.DC.) โดยเครื่อง Electron Paramagnetic Resonance (EPR) spectroscopy.
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
วรนันต์ นาคบรรพต . 2554. "การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารฟลาวานอยด์ที่สกัดจากต้นว่านมหากาฬ (Gynura pseudochina L.DC.) โดยเครื่อง Electron Paramagnetic Resonance (EPR) spectroscopy".
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
วรนันต์ นาคบรรพต . "การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารฟลาวานอยด์ที่สกัดจากต้นว่านมหากาฬ (Gynura pseudochina L.DC.) โดยเครื่อง Electron Paramagnetic Resonance (EPR) spectroscopy."
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2554. Print.
วรนันต์ นาคบรรพต . การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารฟลาวานอยด์ที่สกัดจากต้นว่านมหากาฬ (Gynura pseudochina L.DC.) โดยเครื่อง Electron Paramagnetic Resonance (EPR) spectroscopy. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2554.